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- 食品企業(yè)檢測(cè)方案
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? 1 非洲豬瘟簡(jiǎn)介
非洲豬瘟（英文名稱：African Swine fever，簡(jiǎn)稱：ASF）是由非洲豬瘟病毒（英文名稱：African Swine fever virus，簡(jiǎn)稱：ASFV）感染家豬和各種野豬（如非洲野豬、歐洲野豬等）引起一種急性、出血性、烈性傳染病。非洲豬瘟病毒是非洲豬瘟科非洲豬瘟病毒屬的重要成員，病毒有些特性類似虹彩病毒科和痘病毒科。病毒粒子的直徑為175－215納米，呈20面體對(duì)稱，有囊膜。基因組為雙股線狀DNA，大小170－190kb。在豬體內(nèi)，非洲豬瘟病毒可在幾種類型的細(xì)胞漿中，尤其是網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞中復(fù)制。該病毒可在鈍緣蜱中增殖，并使其成為主要的傳播媒介。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為法定報(bào)告動(dòng)物疫病，該病也是我國(guó)重點(diǎn)防范的一類動(dòng)物疫情。
? 2 非洲豬瘟在我國(guó)的發(fā)病情況
自2018年8月3日我國(guó)確診首例非洲豬瘟疫情以來(lái)，我國(guó)已經(jīng)在遼寧、安徽、黑龍江、海南等地接連爆發(fā)非洲豬瘟疫情。盡管非洲豬瘟傳入我國(guó)僅幾年的時(shí)間，但已經(jīng)在多地接連爆發(fā)，造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失，而且非洲豬瘟臨床癥狀與豬瘟癥狀相似，只能依靠實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測(cè)確診。在目前的情勢(shì)下，急需一種能對(duì)非洲豬瘟進(jìn)行快速檢測(cè)的方案！
? 3 非洲豬瘟病毒(ASFV)實(shí)時(shí)等溫?cái)U(kuò)增儀配置清單
|
項(xiàng)目 |
序號(hào) |
物品名稱 |
型號(hào)規(guī)格 |
單位 |
數(shù)量 |
備注 |
|
主 機(jī) 箱 |
1. |
儀器主機(jī) |
HW-ZW16 |
臺(tái) |
1 |
|
|
2. |
儀器使用說(shuō)明書(shū) |
|
個(gè) |
1 |
|
|
|
3. |
合格證/保修卡 |
|
本 |
2 |
|
|
|
4. |
儀器電源線 |
|
根 |
1 |
|
|
|
5. |
鋁合金箱 |
|
個(gè) |
1 |
|
|
|
配 件 箱 |
6. |
電子天平 |
0-500g |
臺(tái) |
1 |
|
|
7. |
樣品杯 |
50mL |
個(gè) |
24 |
|
|
|
8. |
移液槍 |
1-5ml |
把 |
1 |
|
|
|
9. |
移液槍槍頭 |
1-5ml |
包 |
1 |
|
|
|
10. |
移液槍 |
100μL-1000μL |
把 |
1 |
|
|
|
11. |
移液槍槍頭 |
100μL-1000μL |
包 |
1 |
|
|
|
12. |
移液槍 |
10μL-100μL |
把 |
1 |
|
|
|
13. |
移液槍槍頭 |
10μL-100μL |
包 |
1 |
|
|
|
14. |
移液槍 |
2μL-20μL |
把 |
1 |
|
|
|
15. |
移液槍槍頭 |
2μL-20μL |
包 |
1 |
|
|
|
16. |
剪刀 |
|
把 |
1 |
|
|
|
17. |
鑷子 |
|
把 |
1 |
|
|
|
18. |
研缽 |
直徑8cm |
個(gè) |
1 |
|
|
|
19. |
離心機(jī) |
大龍D1008 |
臺(tái) |
1 |
|
|
|
20. |
離心管 |
1.5mL |
個(gè) |
50 |
|
|
|
21. |
PCR管 |
0.2mL |
個(gè) |
50 |
|
|
|
22. |
非洲豬瘟病毒熒光等溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)試劑 |
48T/盒 |
盒 |
5 |
|
|
|
重 要 配 件 |
23. |
漩渦混勻器 |
|
臺(tái) |
1 |
|
|
24. |
畜牧恒溫箱 |
-10℃~65℃ |
臺(tái) |
1 |
|
|
|
25. |
高速冷凍離心機(jī) |
LC-LX-HR165A |
臺(tái) |
1 |
|
|
|
26. |
研磨儀 |
|
臺(tái) |
1 |
|
|
|
27. |
移液器（5種型號(hào)） |
|
支 |
10 |
|
|
|
28. |
冰箱 |
|
臺(tái) |
1 |
|
? 4 非洲豬瘟病毒(ASFV)實(shí)時(shí)等溫?cái)U(kuò)增儀技術(shù)參數(shù)
|
儀器型號(hào) |
HW-ZW16 |
|
樣品通量 |
16x0.2ml，兼容單管和8聯(lián)管 |
|
加熱方式 |
半導(dǎo)體制冷片結(jié)合電性電阻熱紅外技術(shù) |
|
溫控范圍 |
室溫～85℃ |
|
溫控精度 |
±0.1℃ |
|
溫度均一性 |
±0.15℃ |
|
激發(fā)光波長(zhǎng) |
第一通道：470nm±10nm |
|
檢測(cè)光波長(zhǎng) |
第一通道：520nm±10nm |
|
激發(fā)光 |
高亮度LED |
|
檢測(cè)器 |
新型光學(xué)檢測(cè)器，結(jié)合數(shù)字電路控制，光信號(hào)穩(wěn)定 |
|
熒光傳導(dǎo)方式 |
太空專用光纖傳導(dǎo) |
|
結(jié)果判讀方式 |
根據(jù)擴(kuò)增曲線軟件自動(dòng)判讀陰陽(yáng)性 |
|
結(jié)果顯示 |
可在機(jī)器顯示擴(kuò)增曲線及出峰時(shí)間 |
|
檢測(cè)時(shí)間 |
≤40分鐘 |
|
檢測(cè)試劑 |
開(kāi)放式恒溫?zé)晒鈾z測(cè)試劑 |
|
操作軟件 |
自帶軟件 |
|
控制方式 |
觸屏控制 |
|
檢測(cè)項(xiàng)目 |
可同時(shí)最多檢測(cè)16個(gè)項(xiàng)目 |
|
檢測(cè)靈敏度 |
10～109拷貝/反應(yīng)，且樣品間無(wú)交叉污染 |
|
儀器分析功能 |
根據(jù)所檢測(cè)樣品，直接分析判定陽(yáng)性或陰性；也可通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行絕對(duì)定量 |
|
軟件設(shè)置功能 |
可選擇反應(yīng)程序；可對(duì)反應(yīng)程序進(jìn)行設(shè)置，如可設(shè)置反應(yīng)時(shí)間、可在反應(yīng)過(guò)程中修改反應(yīng)時(shí)間（縮短或延長(zhǎng)）、可設(shè)置不同溫度，每個(gè)溫度檔位差為0.1℃；可將反應(yīng)程序保存為模板；可對(duì)不同孔進(jìn)行重命名；可設(shè)置掃描間隔時(shí)間，范圍為18～60S，默認(rèn)間隔為 60S；可設(shè)置陰陽(yáng)性判斷閾值；閾值線可上下拉動(dòng)等 |
|
工作環(huán)境溫度 |
18～35℃ |
|
儲(chǔ)存溫度 |
-20℃～55℃ |
|
環(huán)境相對(duì)濕度 |
≤85% |
|
工作電壓 |
100～240V，50～60Hz |
?5 非洲豬瘟病毒熒光等溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)試劑盒技術(shù)參數(shù)
作用與用途：
用于血液、血球粉、淋巴結(jié)、脾臟、扁桃體以及豬肉產(chǎn)品中非洲豬瘟病毒核酸的檢測(cè)。
1.規(guī)格：
48次/盒；
2.保存條件：
-20℃保存；
3.組成：
熒光等溫?cái)U(kuò)增免提取反應(yīng)液：1100ul；Bst DNA聚合酶：75ul；陰性對(duì)照：1000ul；陽(yáng)性對(duì)照：200ul；礦物油：1000ul；說(shuō)明書(shū)：1份；
4.有效期：
12個(gè)月；
5.檢測(cè)試劑盒應(yīng)用范圍
本試劑盒適用于便攜式熒光定量PCR儀檢測(cè)箱及各種其他型號(hào)熒光定量PCR儀；
6.反應(yīng)體系：
25ul；反應(yīng)時(shí)間：1h；報(bào)告基團(tuán)：FAM；淬滅基團(tuán)：None；
7.結(jié)果判定：
有明確判定標(biāo)準(zhǔn)，被檢樣品熒光信號(hào)有指數(shù)型增長(zhǎng)，陽(yáng)性對(duì)照Tt值≤45并出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線，陰性對(duì)照無(wú)Tt值并且無(wú)擴(kuò)增曲線即S型擴(kuò)增曲線，結(jié)果成立；被檢樣品Tt值≤45并出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線為陽(yáng)性；被檢樣品無(wú)Tt值并且無(wú)典型擴(kuò)增曲線為陰性；被檢樣品Tt值在45-60之間并出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線為可疑。對(duì)于可疑結(jié)果應(yīng)重新檢測(cè)，如果樣品FAM通道仍有典型S型擴(kuò)增曲線且Tt值≤60，則判定為陽(yáng)性，否則為陰性；
8.試劑盒特性
本試劑盒經(jīng)中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心評(píng)價(jià)，診斷敏感性100%，特異性100%；
9.推薦產(chǎn)品
該產(chǎn)品為疫控（診）【2019】74號(hào)文件中推薦的產(chǎn)品；
10. 產(chǎn)品資質(zhì)
產(chǎn)品生產(chǎn)廠家具有分子生物學(xué)類診斷制品GMP車間。